多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从 C 端(基端)向 N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。现在多采用固相合成法，从而大大地减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羚基端是游离的，并且在反应之前必须活化。化学合成方法有两种，即Fmoc 和 tBoc。由于 Fmoc 比 tBoc 存在很多优势，现在大多采用 Fmoc 法合成：

具体合成有下列几个循环组成：

一、去保护：Fmoc 保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂 ( piperidine)去 除氨基的保护基团；

二、激活和交联:下一个氨基酸的羚基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联，形成肚键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。循环:这两步反应反复循环直到合成完成；

三、洗脱和脱保护：多肽从柱上洗脱下来，其保护基团被一种脱保护剂( TFA) 洗脱和脱保护。

固相合成的成肽反应基本上都是将两个相对应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸放进水溶液内不一定形成肽键，要形成酰胺键，最常用的手段是把羧基活化，变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的缩合剂（如碳二亚氨）形成对称酸酐等方式来形成酰胺键，在合成所需长度的多肽链合成完成后，将多肽链从固相载体上解离下来。

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