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蛋白偶联是指两个或多个蛋白质通过非共价化学键（如脯氨酸磷酸化、蛋白质泛素化等）或共价化学键（如二硫键）相互结合形成复合物的过程，蛋白偶联对于调节细胞的信号传导、调控基因表达，维持细胞功能的正常运转起着重要的作用，那么蛋白偶联纯化方法有哪些呢？今天小编在下面给大家做详细解答。
偶联物纯化色谱法主要包括凝胶渗透色谱法、离子交换色谱法、疏水作用和反相色谱法、亲和色谱法。
凝胶具有化学惰性，不具有吸附、分配和离子交换作用，在凝胶渗透色谱法中，固相载体为具有多孔结构的凝胶颗粒，当混合物流经色谱柱时，较小的分子会通过孔内，路径较长而流出速度较慢，而较大的分子只会通过颗粒间隙，路径较短可以快速流出。
根据偶联混合物的不同分子大小可以实现分离，与蛋白质偶联物大分子相比，未反应的蛋白质和小分子单体更容易进入孔内。
离子交换色谱法是以带有电荷的离子交换树脂或化学键合离子交换剂为固相载体，利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离，根据交换离子所带电荷不同可以分为阴离子和阳离子交换色谱法。
3、疏水作用和反相色谱法
疏水作用色谱法和反相色谱法是利用待分离物质与固定相的疏水作用的不同，用流动相洗脱时，各组分迁移速率不同而达到分离的目的。疏水作用色谱的固定相非极性较弱，其表面为弱疏水基团，其疏水性较反相色谱的固定相低几十至几百倍，可以避免较强疏水性引起的蛋白质不可逆吸附和变性。
4、亲和色谱法
亲和色谱法是利用固定相的结合特性来分离的方法，其固定相能够特异性识别一种或一类化合物，从而使目标偶联物从混合物中分离出来。
以上就是小编给大家介绍的蛋白偶联物纯化方法这块的相关知识哦，我们在做选择的时候，需要结合具体的情况来选择哦，强耀生物专注于多肽合成、蛋白表达、抗体制备等，从事于多肽行业多年，产品品质一流，欢迎广大客户前来咨询。
疏水作用色谱法和反相色谱法是利用待分离物质与固定相的疏水作用的不同，用流动相洗脱时，各组分迁移速率不同而达到分离的目的。疏水作用色谱的固定相非极性较弱，其表面为弱疏水基团，其疏水性较反相色谱的固定相低几十至几百倍，可以避免较强疏水性引起的蛋白质不可逆吸附和变性。
亲和色谱法是利用固定相的结合特性来分离的方法，其固定相能够特异性识别一种或一类化合物，从而使目标偶联物从混合物中分离出来。
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