| 全基因合成 | 分析基因序列,优化密码子,合成目的基因,提供载体 | 1-2周 |
| 重组质粒的构建 | 选用合适的载体,合适的标签(eg:His,GST,Fc,SUMO)构建重组供体质粒“pfastbacⅠ-target”(target代表目标基因) | 1周 |
| 重组杆粒的制备 | 转化重组供体质粒至DH10bac感受态细胞,蓝白斑筛选阳性克隆并使用PCR反复鉴定,最后碱裂解小提重组杆粒 | 1周 |
| 细胞转染 | 复苏并传代悬浮培养的SF21细胞,使用化学转染试剂将重组杆粒转染入SF21细胞以制备P1代重组杆状病毒 | 1周 |
| 重组蛋白的表达 | 利用P1代杆状病毒制备P2代病毒、利用P2代病毒侵染大规模培养的SF21细胞以表达重组蛋白 | 1周 |