| 基因合成及酵母表达载体亚克隆 | 密码子优化,基因合成(或客户提供质粒模板:目的基因扩增);将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上,可提供表达载体,如pPICZaA 、pGAPZaA、pPIC9K;拼接序列验证:测序;交付:正确构建的重组表达质粒,含重组质粒的DH5α菌株及测序原始报告 | 1-2周 |
| 酵母表达菌株转化 | 可提供表达菌株:X33,GS115,酿酒酵母等。扩增培养5-10个阳性克隆并进行重组蛋白诱导表达。SDS-PAGE交付:阳性克隆菌株及表达筛选结果报告。 | 2周 |
| 酵母表达菌株筛选 | 检测重组蛋白表达情况(适用于多拷贝数和高表达菌株)交付:阳性克隆菌株及表达筛选结果报告。 | 2周 |
| 酵母表达菌株表达优化 | 对挑选出来的单克隆菌株,优化培养及诱导条件(培养基,菌体密度,甲醇浓度,诱导时间等),提高目标蛋白的表达量。 | 2周 |
| 小规模蛋白表达及纯化 | 1L发酵液通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。SDS-PAGE交付:重组蛋白0.02-3mg及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度至少>85%。 | 1-3周 |